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对于液相色谱仪色谱柱保养须知
点击次数:95 发布时间:2020-03-19
  
  
  液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
  
  正常情况下,液相色谱仪色谱柱至少可以使用3~6个月,能完成数百次分离。但若操作不慎,将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性,必须对色谱柱进行仔细保养。
  
  一、色谱柱的保护:
  
  1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。
  
  2、加3~5cm保护柱。
  
  3、进样阀进样。
  
  4、用纯甲醇保存色谱柱,防止细菌生长。
  
  5、防止过酸或过碱。
  
  6、防止振动和逆向流动。
  
  7、对硅胶基键合相,水溶液流动相的PH值不得超出2~8.5的范围,使用温度不宜过高。
  
  8、色谱柱在酸性或碱性条件下使用后,应依次用水和甲醇清洗。对暂时不用而需要较长时间保存的色谱柱,要用纯甲醇清洗。
  
  9、色谱柱两端用金属螺帽封闭,保存在干净的有机溶剂中。
  
  二、色谱柱的再生:
  
  一般情况下,硅胶和ODS等化学键合固定相再生是困难的。有时采用下述方法可能提高柱效。
  
  1、由于杂质微粒等因素,使色谱柱上端固定相变色,柱效下降。这时,可仔细地将变色部分除去约3mm左右,再补充新的固定相。
  
  2、当色谱柱吸附未被洗脱的成分时,柱效将明显下降,可选择合适的溶剂洗净。
  
  3、当采用梯度洗脱时,色谱柱在重复使用前,用泵把几倍于柱体积的起始溶剂压经色谱柱,以重新建立起始的平衡来得到再生。
  
  
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